Состав крови образован плазмой и форменными компонентами, большую часть из которых составляют эритроциты. Зрелые кровяные клетки не содержат ядра и имеют двояковогнутую форму. Главная их функция – транспортировка газов в тканях органов. Уровень эритроцитарных клеток в крови человека зависим от таких факторов, как пол и возраст, но является величиной достаточно постоянной, поэтому колебание их количества дает ценную информацию в процессе диагностирования.

Для вычисления количества кровяных клеток чаще всего используется унифицированный метод подсчета эритроцитов с использованием оборудования, известного, как камера Горяева, либо с помощью электронных счетчиков автоматического типа. Оба способа на данный момент широко используются и в ежедневной лабораторной практике, и при научных изысканиях, так как погрешность результатов, полученных в ходе их применения, минимальна.

Строение камеры Горяева

Оптическое устройство – камера Горяева позволяет вычислить количество кровяных клеток в определенном объёме специальной жидкости. Идея создания устройства принадлежит русскому профессору Горяеву Н. К.

Главный элемент устройства – прозрачное предметное стекло с камерой, образованной углублением в форме прямоугольника, поверхность которой покрыта специальной микроскопической сеткой, и тонкое покровное стекло. Высокая точность результатов подсчета достигается благодаря повышенному объёму сетки в сравнении с аналогичными устройствами других типов.

Сетка устройства имеет площадь 9 мм², размер одной стороны составляет 3 мм. Поверхность данного элемента образована квадратами общим числом в 225 шт. Из них одна сотня квадратов поделена на прямоугольники, еще столько же – не разграфлено, а 25 штук поделены на 16 более маленьких. Площадь 1 малого квадрата составляет 1/400 мм², область над ним имеет объём 1/4000 мм³.

Мнение врачей:

Метод подсчета количества эритроцитов в крови с помощью камеры Горяева является широко используемым и достаточно точным способом оценки этого показателя. Врачи отмечают, что данная методика позволяет проводить быстрый и надежный анализ крови, что особенно важно при диагностике различных заболеваний, связанных с кроветворением. Камера Горяева обладает высокой чувствительностью и позволяет проводить исследование с минимальным количеством образца крови, что делает процесс более комфортным для пациента. Благодаря этому методу врачи могут быстро получить необходимую информацию о состоянии крови пациента и принять соответствующие меры по лечению или контролю заболевания.

https://www.youtube.com/embed/QO6u4qJwAaY

Разбавление крови с целью исследования

Определение количества эритроцитов состоит из нескольких последовательных действий. Первым этапом становится разведение определенного объёма крови в реагенте. Делается это в связи с огромным числом форменных элементов.

В качестве реагента чаще всего выступает раствор хлорида натрия концентрацией 0,9%. При необходимости альтернативой служит 5% раствор натрия цитрата. Процедуру разбавления крови выполняют в пробирке или в специальном смесителе, называемом меланжером.

Внимание! Использование растворов с более высокой или низкой концентрацией исключено, так как повлечет за собой разрушение кровяных клеток.

Разбавление крови в меланжере

Меланжером называется изготовленный из стекла градуированный капилляр длинной 10 см с расширением на конце, внутри которого расположен шарик. Последний выполняет важную функцию – равномерное смешивание раствора и крови. Цвет шарика меланжерного капилляра будет красным, если он предназначен для эритроцитов, и белым – для работы с лейкоцитами.

Методика подсчета эритроцитов позволяет проводить процедуру исследования и со стабилизированной кровью, и с нестабилизированным материалом сразу после его забора у пациента.

Кровь набирают меланжерным капилляром до деления 0,5, после чего кончик смесителя очищают от крови с помощью марли либо ватки и следующим действием набирают разбавляющий раствор до деления 101. Перекрыв пальцами отверстия капилляра, полученный образец тщательно смешивают около 3 минут. В счётную камеру помещают четвёртую каплю, предварительно удалив первые три на марлю. Таким образом получают разбавление крови в 200 раз.

КАМЕРА ГОРЯЕВА | Как проводить Анализ Крови | Правила и Формулы подсчёта Лейкоцитов и Эритроцитов

Опыт других людей

Метод подсчета количества эритроцитов в крови с помощью камеры Горяева вызывает много положительных отзывов среди специалистов и пациентов. Этот метод считается одним из самых точных и надежных способов определения уровня эритроцитов в крови. Благодаря использованию камеры Горяева, возможно провести быстрый и точный анализ крови, что позволяет диагностировать различные заболевания, связанные с кроветворением. Этот метод широко применяется в клинической практике и получил признание за свою эффективность и точность результатов.

Разбавление крови в пробирке

При пробирочном методе разбавления крови исследуемый материал разводят в 200 раз следующим образом: 4 мл раствора хлорида натрия помещают в пробирку, после чего добавляют 0,02 мл крови.

Для этого забор материала производят пипеткой, кончик которой протирают ваткой или другой тканью. Образец крови помещают на дно пробирки, пипетку промывают ближе к поверхности раствором хлорида натрия. Готовый образец перемешивают и оставляют до дальнейшего этапа исследования, но менее чем на 3 часа.

Подсчёт лейкоцитов в счётной камере под микроскопом

Подсчет количества эритроцитов

Камера Горяева обязательно располагается горизонтально. Всю площадь сетки аккуратно заполняют разведенным образцом. Важно проследить, чтобы не образовались пузырьки воздуха, ведь их наличие значительно исказит результат. В таком положении камера остается в течение одной минуты с целью оседания кровяных клеток.

Унифицированный метод подсчета эритроцитов проходит при среднем увеличении посредством микроскопического осмотра. Подсчет числа эритроцитов в камере Горяева ведут в 5 больших квадратах, поделенных на 16 малых. Начало отсчета рекомендовано производить с большого квадрата, находящегося вверху слева, и далее по диагонали.

Важно! Чтобы количество клеток, находящихся на линиях малых квадратов, не было подсчитано дважды, рекомендуют пользоваться правилом Егорова: в каждом квадрате вести подсчет по двум определенным линиям (верхней и левой).

Начинают высчитывание клеток в малых квадратах в верхнем ряду слева направо от 1-го до 4-го в этом ряду. Переходя к следующему ряду, подсчет ведут в обратном порядке – справа налево. Переход к подсчету клеток в следующем большом квадрате производят после вычисления эритроцитов в этих 16 малых квадратах.

Непосредственно расчет числа эритроцитов ведут по формуле, отображенной на рисунке №2.

Обозначения в данной формуле расшифровываются следующим образом:

• X – искомое число красных кровяных клеток в 1 мкл крови;
• A обозначает количество сосчитанных клеток;
• 200 – разбавление крови;
• 80 – это количество малых посчитанных квадратов;
• 1/4000 – объем маленького квадрата.

Внимание! Для достоверности результата расчет кровяных клеток при некоторых видах анемии необходимо проводить непосредственно после забора материала.

Возможные причины искажения результата

Как и любой другой лабораторный анализ, подсчет эритроцитов требует тщательной подготовки и аккуратности в исполнении. Искажение результатов анализа может возникнуть вследствие целого ряда причин. Оборудование хранят в сухом месте. Любая лабораторная работа, связанная с кровью, выполняется в резиновых перчатках.

Для начала следует убедиться в правильности подготовки и использования камеры. Перед работой и по ее окончании устройство необходимо тщательно промывать дистиллированной водой и насухо протирать мягкой тканью. Покровное стекло должно быть подготовлено заблаговременно таким же образом.

Возможные причины, влияющие на достоверность результата:

• Некачественные реактивы, способные вызывать гемолиз.
• Формирование сгустка крови в материале.
• Неаккуратность в процессе забора крови в капилляр.
• Плохо обработанные пробирки и пипетки.
• Недобросовестная техника исполнения при работе с камерой и подсчете эритроцитов.
• Высчитывание клеток сразу же после заполнения камеры (необходимо выждать 1 минуту, чтобы они успели осесть на поверхность).

В последнее время все большую популярность получает метод подсчета эритроцитов с использованием электронных счетчиков автоматического типа. Такая тенденция вполне обоснованна, так как автоматизированный процесс исследования значительно точнее и менее трудоёмок.

Принцип действия данного оборудования основан на разном показателе электропроводности клеток крови и раствора, в котором они помещены. Специальное электромагнитное устройство регистрирует изменение уровня сопротивления электрической цепи, когда эритроциты движутся через отверстие капилляра. Уже через несколько секунд на цифровом табло высвечивается результат с высчитанным числом клеток.

Повышенный показатель красных кровяных клеток в анализе называется полицитемией. Данное состояние возникает вследствие патологий, характеризующихся потерей жидкости в организме, например при диарейном синдроме. Часто такое явление наблюдается на первых этапах инфекционных заболеваний, при отравлении токсичными веществами и прочем. Снижение же концентрации эритроцитов в крови известно как олигоцитемия. И зачастую такая патология проявляется во время различного вида анемии.

Частые вопросы

Как считать эритроциты в камере Горяева?

Эритроциты в камере подсчитываются в больших квадратах, которые по размерам равны 80-ти малым. Возможно неравномерное распределение крови. Чтобы этого избежать выбираются квадраты по диагонали. Клетки, которые расположены по краям предназначены для подсчета эритроцитов.

Какие методы используют для определения количества эритроцитов?

В настоящее время для определения количества эритроцитов (RBC, red blood cell) используют два метода: подсчет эритроцитов в счетной камере Горяева и с помощью автоматических счетчиков и анализаторов.

Как считать на камере Горяева?

Подсчет форменных элементов крови N=m4000s/q, где N – искомое количество ФЭ в 1 мкл крови, m – число ФЭ в определенном количестве малых квадратов, q – количество малых квадратов сетки камеры Горяева, в которых подсчитывались ФЭ, s – степень разведения крови.

Каким раствором разбавляют кровь для подсчета эритроцитов в камере Горяева?

4. 5% раствором уксусной кислоты + метиленовый синий.

Полезные советы

СОВЕТ №1

При подсчете количества эритроцитов в крови с помощью камеры Горяева, убедитесь, что камера и все используемые инструменты абсолютно чистые, чтобы избежать ошибок в результате.

СОВЕТ №2

Тщательно обучитесь методике подсчета с использованием камеры Горяева перед началом работы, чтобы правильно провести процедуру и получить точные данные.

СОВЕТ №3

При подсчете количества эритроцитов, не торопитесь и проводите процедуру в спокойной обстановке, чтобы избежать ошибок и получить надежные результаты.